Διάρκεια
1–3 ώρες (προσαρμόσιμη)
Επίπεδο
Γυμνάσιο–Φοιτητές / Ενήλικες
Κατάλληλο για
Τάξεις, ομάδες, STEM προγράμματα
Πιστοποιητικό
Παρέχεται από Bio‑Academy
Επισκόπηση μαθήματος
Οι συμμετέχοντες γνωρίζουν τη λογική των σταδίων που οδηγούν σε καθαρή απεικόνιση χρωμοσωμάτων: προ-επεξεργασία ιστού για καλύτερη διάταξη, στοχευμένη χρωματική αντίθεση του γενετικού υλικού, προετοιμασία λεπτού παρασκευάσματος και παρατήρηση/τεκμηρίωση σε υψηλή μεγέθυνση. Η έμφαση είναι στην αναγνώριση μορφολογικών χαρακτηριστικών και στην τακτική οργάνωση ενός βασικού καρυοτύπου.
Δομή μαθήματος
- Προ-επεξεργασία ιστού: Ήπια κατεργασία για μαλάκωμα κυτταρικών τοιχωμάτων και ανάδειξη μεταφασικών πλακών (χωρίς δημοσίευση συνταγών).
- Χρώση χρωμοσωμάτων: Εφαρμογή χρωστικής που προσφέρει καθαρή αντίθεση για μικροσκοπική παρατήρηση.
- Προετοιμασία παρασκευάσματος: Δημιουργία ομοιόμορφου, λεπτού επιχρίσματος με καλή διασπορά χρωμοσωμάτων.
- Μικροσκόπηση & ανάλυση: Κλιμακωτή μεγέθυνση, επιλογή «καλών» πεδίων, φωτοτεκμηρίωση και βασική οργάνωση ζευγών στον καρυότυπο.
- Υδρόλυση
Εργασία: Μαλάκωμα κυτταρικών τοιχωμάτων στις ριζικές άκρες.
Οδηγίες:- Ξεπλύνετε τις προεπεξεργασμένες άκρες ριζών με απεσταγμένο νερό.
- Βυθίστε τες σε 1 N HCl, 60°C, 8–10′.
- Στόχος: διάσπαση κυτταρικών τοιχωμάτων για καλύτερη διάχυση/διάταξη χρωμοσωμάτων στα επόμενα βήματα.
- Χρώση
Εργασία: Χρωματισμός υδρολυμένων άκρων ριζών για μικροσκοπική ανάλυση.
Οδηγίες:- Καλύψτε με ακετο‑ορσεΐνη ή ακετο‑καρμίνη 2% για ~30′.
- Η χρωστική δεσμεύεται στα χρωμοσώματα, καθιστώντας τα ευδιάκριτα στο μικροσκόπιο.
- Κουίζ Καρυότυπου (προαιρετικό)
Εργασία: Συμπλήρωση online καρυότυπου μέσα σε 15′.
Οδηγίες:- Συνδεθείτε στο https://shorturl.at/bNnLv.
- Επιλέξτε XY → Play → Start.
- Σύρετε τα χρωμοσώματα στις σωστές θέσεις και πατήστε Send.
- Προετοιμασία αντικειμενοφόρου (μέθοδος SteamDrop)
Εργασία: Παρασκευή πλακών για παρατήρηση χρωμοσωμάτων.
Οδηγίες:- Τοποθετήστε χρωματισμένο άκρο ρίζας σε αντικειμενοφόρο και καλύψτε με καλυπτρίδα.
- Πιέστε ελαφρά για να εξαπλωθούν τα κύτταρα ομοιόμορφα.
- Εφαρμόστε ατμό 3–5″ ώστε να βελτιωθεί η εξάπλωση χρωμοσωμάτων και να μειωθεί ο θόρυβος υποβάθρου.
- Αφήστε να στεγνώσει σε θερμοκρασία δωματίου.
- Μικροσκόπηση & ανάλυση
Εργασία: Παρατήρηση και τεκμηρίωση χρωμοσωμάτων.
Οδηγίες:- Παρατηρήστε σε μικροσκόπιο φωτεινού πεδίου μέχρι 1000x (χρήση oil immersion 100x όταν απαιτείται).
- Εντοπίστε καλά διασκορπισμένα κύτταρα μετάφασης και φωτογραφίστε.
- Καταγράψτε εικόνες και σημειώστε πιθανές ανωμαλίες αριθμού ή δομής χρωμοσωμάτων.
Εργαστηριακός εξοπλισμός
Φυτικό υλικό χαμηλού κινδύνου, βασικά εργαλεία κοπής/προετοιμασίας, φορείς δειγμάτων (αντικειμενοφόρες/καλυπτρίδες), μικροσκόπιο φωτεινού πεδίου με δυνατότητα υψηλής μεγέθυνσης, μέσα βελτίωσης οπτικής αντίθεσης.
Εξοπλισμός ασφαλείας
Τυπικός ατομικός προστατευτικός εξοπλισμός (εργαστηριακό παλτό, γάντια, όπου χρειάζεται προστατευτικά γυαλιά).
Προεργαστηριακή προετοιμασία
Υπενθύμιση κανόνων ασφαλούς χειρισμού χημικών/χρωστικών, σωστής σήμανσης και καθαρισμού πάγκων/εργαλείων.
Βασικοί μαθησιακοί στόχοι
-
Κατανόηση βασικών αρχών προετοιμασίας και ανάλυσης καρυοτύπου.
-
Αποτελεσματική χρήση μικροσκοπίου για ανάδειξη και περιγραφή χρωμοσωμικών δομών.
-
Κριτική αναγνώριση και τεκμηρίωση πιθανών χρωμοσωμικών αποκλίσεων.
Χρήσιμες σημειώσεις
-
Οι αναλυτικές παράμετροι (συγκεντρώσεις, χρόνοι, θερμοκρασίες, ειδικά πρωτόκολλα) παρέχονται μόνο επιτόπου από τον/την εκπαιδευτή/τρια.
-
Εργαστείτε σε καλά αεριζόμενο χώρο όπου απαιτείται και ακολουθήστε τις οδηγίες ασφάλειας για χρωστικές/χημικά.
-
Διατηρήστε καθαρές επιφάνειες και τεκμηριώστε μεθοδικά τα ευρήματά σας.
